家非洲豬瘟參考實驗室 

    為指導養豬場做好非洲豬瘟監測工作✘│，及時發現非洲豬瘟病毒特別是變異株感染情況✘│，提升非洲豬瘟防控能力✘│，特制定本技術指南╃▩。

　　一☁☁╃✘、非洲豬瘟變異株的定義

　　非洲豬瘟變異株包括基因缺失株☁☁╃✘、自然變異株☁☁╃✘、自然弱毒株等✘│，與2018年傳入的非洲豬瘟毒株相比✘│，該類毒株的基因組序列☁☁╃✘、致病力等發生明顯變化╃▩。生豬感染該類毒株後✘│，潛伏期延長✘│，臨床表現輕微✘│，後期可出現關節腫脹☁☁╃✘、皮膚出血型壞死灶✘│，感染母豬產仔效能下降☁☁╃✘、死淘率增高✘│，出現流產死胎/木乃伊胎等╃▩。與傳統的流行毒株相比✘│，生豬感染該類毒株後排毒滴度低☁☁╃✘、間隙性排毒✘│，難以早期發現╃▩。

　　二☁☁╃✘、監測方法

　　（一）加強臨床巡視

　　時刻關注豬場各個環節豬隻異常情況✘│，想方設法提升飼養人員責任心✘│，一旦發現豬隻出現嗜睡☁☁╃✘、輕觸不起☁☁╃✘、採食量減少✘│，發熱☁☁╃✘、皮膚髮紅☁☁╃✘、關節腫脹/壞死☁☁╃✘、咳喘☁☁╃✘、腹式呼吸✘│，育肥豬死淘率增高✘│，母豬流產或出現死胎/木乃伊胎等可疑臨床表現時✘│，應第一時間取樣檢測╃▩。

　　（二）改進主動監測

　　每週對豬群進行病原和抗體檢測╃▩。在豬群進行疫苗接種☁☁╃✘、轉群☁☁╃✘、去勢✘│，或母豬分娩後✘│，應進行取樣檢測╃▩。豬場出現風險暴露或周邊豬場出現感染時✘│，按需進行取樣檢測╃▩。

　　（三）抽樣策略

　　對可疑豬的同舍和關聯舍豬群✘│，採集深部咽拭子和抗凝血✘│，進行病原檢測✘│，必要時採集血清進行抗體檢測╃▩。對可疑豬及臨近豬接觸的地面☁☁╃✘、欄杆✘│，以及舍內人員接觸的物品等✘│，採集環境樣品進行病原檢測╃▩。病原檢測如果混檢✘│，建議混樣數量不超過5個；抗體檢測不得混樣╃▩。

　　（四）樣品選擇

　　對可疑豬✘│，按檢出機率高低排序✘│，依次採集深部咽拭子☁☁╃✘、淋巴結（微創採集）☁☁╃✘、前腔靜脈抗凝血（EDTA）或尾根血☁☁╃✘、口鼻拭子╃▩。

　　對分娩母豬✘│，應採集臍帶血☁☁╃✘、胎衣；對死胎和流產胎兒✘│，應採集淋巴結☁☁╃✘、脾臟等組織樣品╃▩。

　　對病死豬✘│，優選採集部位為淋巴結☁☁╃✘、脾臟☁☁╃✘、骨髓和肺臟╃▩。

　　血清樣本✘│，按常規方法制備╃▩。

　　三☁☁╃✘、檢測方法

　　（一）病原檢測方法

　　採用非洲豬瘟病毒（P72/CD2v/MGF）三重熒光PCR方法檢測核酸✘│，詳見“農辦牧〔2020〕39號”附件《非洲豬瘟病毒流行株與基因缺失株鑑別檢測規範》╃▩。必要時可測序鑑別╃▩。

    （二）抗體檢測方法

    採用間接ELISA☁☁╃✘、阻斷ELISA等方法檢測抗體水平✘│，詳見《非洲豬瘟診斷技術》（GB/T 18648）╃▩。